CLED Agar je kultivační půda, určená pro inhibici plazivého růstu protea při kultivaci grampozitivních a gramnegativních bakterií močového ústrojí.
CLED Agar (Cystine Lactose Electrolyte Deficient) je neselektivní diferenciální médium pro růst a stanovení počtu mikroorganismů močových cest. Vynechání chloridu sodného inhibuje rojení Proteus a podporuje růst naprosté většiny bakterií způsobujících infekce močových cest a používá se k jejich rozlišení a identifikaci. Přítomnost bakteriálních kontaminantů, jako jsou difteroidy, laktobacily a další mikroby značí míru opatrnosti při manipulaci se vzorkem moči.
Mikroorganismy, které způsobují infekci v močovém traktu, jsou obecně hojné a pouze jednoho druhu. Nejčastěji izolovaným organismem je E. coli.
Hovězí extrakt a kaseinový pepton poskytují dusík, vitamíny, minerály a aminokyseliny nezbytné pro růst. Laktóza je fermentovatelný sacharid poskytující uhlík a energii. L-Cystin se přidává jako růstový doplněk pro koliformní bakterie závislé na cystinu.
Diferenciace laktózových fermentorů a laktózových nefermentorů je dosaženo použitím bromthymolové modři jako indikátoru pH. Organismy, které fermentují laktózu, snižují pH a mění barvu média ze zelené na žlutou. Ztužujícím činidlem je bakteriologický agar.
Přibližná definice půdy/1 litr purifikované vody
Laktóza: 10,0 g
Cystin: 0,128 g
Kaseinový pepton: 4,00 g
Želatinový pepton: 4,00 g
Bromthymolová modř: 0,02 g
Hovězí extrakt: 3,00 g
Agar: 15,0 g
výsledné pH: 7,3 ± 0,2 při 25°C
Příprava
36 g média rozpustíme v 1 litru destilované vody. Dobře promíchejte a za stálého míchání zahříváním rozpusťte. Vařte po dobu 1 minuty. Sterilizujte v autoklávu při 121 °C po dobu 15 minut. Zchlaďte na 50 °C, dobře promíchejte a rozplňte do misek. Když médium ztuhne, obraťte misky, abyste zabránili vzniku přebytečné vlhkosti. Uchovávejte při 2-8 °C. Barva připraveného média je zelená. Dehydrované médium by mělo být homogenní, sypké, zeleno-béžové barvy.
