Laboratórna diagnostika ochorení prenášaných kliešťami: od prvých testov po komplexné prípady

Ochorenia prenášané kliešťami sa týkajú čoraz širšieho okruhu poskytovateľov zdravotnej starostlivosti v Európe. Výskyt kliešťov schopných prenášať pôvodcov lymskej boreliózy a kliešťovej encefalitídy je doložený v čoraz severnejších oblastiach aj vo vyšších nadmorských výškach.

Pri kliešťovej encefalitíde pritom zostáva geografické rozšírenie výrazne ohniskové. Údaje z európskeho epidemiologického dohľadu ukazujú, že oblasti s vyšším počtom hlásených prípadov sa v súčasnosti sústreďujú predovšetkým v strednej, východnej a severnej Európe.

European Centre for Disease Prevention and Control. Miera hlásených lokálne získaných prípadov kliešťovej encefalitídy za rok 2023 [Internet]. Stockholm: ECDC; 10. 4. 2025 [cit. 2. 9. 2026]. 
Dostupné z: https://www.ecdc.europa.eu/en/publications-data/notification-rates-locally-acquired-tick-borne-encephalitis-cases-reported-2023

Pre laboratóriá môže širšia geografická relevancia ochorení prenášaných kliešťami znamenať pestrejšie spektrum klinických otázok, typov vzoriek aj požiadaviek na vyšetrenia. Pre distribútorov je preto dôležité rozpoznať, aký diagnostický postup dané laboratórium používa, aké potreby v rámci neho rieši a ktoré metódy ho môžu vhodne doplniť.

V mnohých klinických situáciách nestačí jediný test. Je potrebné rozlíšiť, kedy je vhodné prvotné vyšetrenie protilátok, kedy reaktívny alebo hraničný výsledok vyžaduje konfirmáciu, kedy je potrebné vyšetriť párové vzorky séra a mozgovomiechového moku a kedy môžu byť prínosné podrobnejšie informácie o reaktivite voči jednotlivým antigénom.

Jedno kliešť, niekoľko diagnostických otázok

Samotný dôkaz protilátkovej odpovede často nie je konečným výsledkom diagnostického procesu – ďalší postup závisí od charakteru nálezu a klinického kontextu. Zodpovedá protilátková odpoveď lymskej borelióze alebo TBE? Vyžaduje reaktívny či hraničný výsledok vyšetrenia protilátok proti boréliám konfirmáciu? Môžu byť neurologické príznaky prejavom neuroboreliózy? Ako pri interpretácii výsledkov zohľadniť predchádzajúce očkovanie proti TBE? Alebo je potrebné zvažovať anaplazmózu?

Výzvou nie je iba protilátky detegovať, ale získať výsledok so zodpovedajúcou výpovednou hodnotou v kontexte predpokladaného ochorenia, klinických prejavov a anamnézy pacienta.

Jednotlivé klinické otázky kladú na laboratórnu diagnostiku odlišné požiadavky. Kombinácia flexibilného alebo automatizovaného vyšetrenia, antigénovo špecifickej konfirmácie a podrobnejšieho vyšetrenia umožňuje zvoliť metódu a rozsah informácií zodpovedajúci konkrétnej diagnostickej situácii.

Lymská borelióza: rozhoduje načasovanie aj kontext

Výpovedná hodnota sérologického vyšetrenia sa v priebehu lymskej boreliózy mení. Typické erythema migrans sa diagnostikuje predovšetkým klinicky a testy na protilátky môžu byť v skorom štádiu infekcie stále negatívne. Pri diseminovaných alebo neskorých formách ochorenia sa sérológia stáva dôležitou súčasťou diagnostického procesu, výsledky je však naďalej potrebné interpretovať spolu s klinickým nálezom a s ohľadom na dĺžku trvania ochorenia.

Ak je výsledok prvotného imunoanalytického vyšetrenia protilátok proti boréliám reaktívny alebo hraničný, zvyčajne nasleduje špecifickejší konfirmačný test. Tento dvojstupňový prístup pomáha objasniť nálezy, ktoré môžu byť dôsledkom skríženej reaktivity, a poskytuje podrobnejší podklad na interpretáciu.

Pre laboratórnu diagnostiku lymskej boreliózy ponúka BioVendor metódy CLIA a ELISA na vyhľadávacie vyšetrenie protilátok. Portfólio dopĺňajú BLOT-LINE a Microblot-Array na antigénovo špecifickú konfirmáciu a podrobnejšie posúdenie protilátkovej odpovede.

Pri podozrení na neuroboreliózu nestačí rutinné vyšetrenie protilátok proti boréliám v sére. Vzorky séra a mozgovomiechového moku by sa mali odobrať súčasne, aby bolo možné vypočítať index protilátok špecifických proti boréliám a zároveň vyhodnotiť zápalové parametre v mozgovomiechovom moku. Tento postup pomáha posúdiť, či dochádza k produkcii protilátok špecifických proti boréliám v centrálnom nervovom systéme.

Na stanovenie protilátkového indexu možno využiť vybrané testy CLIA a ELISA určené pre párové vzorky séra a mozgovomiechového moku.

TBEV: keď musí sérológia zohľadniť viac než samotný dôkaz protilátok

Kliešťová encefalitída je vírusová infekcia centrálneho nervového systému a v endemických oblastiach Európy má naďalej značný význam. Po rozvoji neurologických príznakov je diagnostika založená predovšetkým na sérológii: špecifické protilátky IgM a IgG sa zvyčajne detegujú v sére a v indikovaných prípadoch aj v mozgovomiechovom moku. Molekulárna biológia má v tejto fáze diagnostiky obmedzený význam, pretože virémia spravidla predchádza neurologickej fáze ochorenia.

Interpretácia však môže byť náročná. Protilátky IgM špecifické pre TBEV môžu pretrvávať, zatiaľ čo IgG môžu odrážať skôr prekonanú infekciu alebo očkovanie. Výsledok ich stanovenia môže navyše ovplyvniť skrížená reaktivita protilátok proti iným flavivírusom. Samotný pozitívny výsledok IgG preto môže mať v očkovanej populácii len obmedzenú výpovednú hodnotu.

Spoľahlivá interpretácia si vyžaduje spoločné posúdenie výsledkov IgM a IgG v kontexte očkovacej anamnézy pacienta, načasovania odberu vzorky a klinických prejavov.

Pre sérologickú diagnostiku TBE ponúka BioVendor metódy CLIA a ELISA na stanovenie protilátok IgM a IgG vrátane aplikácií relevantných pre vyšetrenie očkovanej populácie a prípadne aj na stanovenie avidity IgG.

Anaplasma: cielená otázka v rámci diagnostického postupu

Ľudská granulocytárna anaplazmóza sa často prejavuje ako akútne nešpecifické horúčkovité ochorenie, ktoré možno klinicky len ťažko odlíšiť od iných infekcií. Vyšetrenie na Anaplasma phagocytophilum sa preto zvyčajne zvažuje vtedy, ak príznaky pacienta a anamnéza prisatia kliešťa vyvolávajú konkrétne podozrenie na anaplazmózu alebo ak sa preveruje možná koinfekcia s iným patogénom prenášaným kliešťami. Nemusí byť súčasťou každého vstupného vyšetrenia zameraného na ochorenia prenášané kliešťami.

Na sérologické vyšetrenie vybraných prípadov ponúka BioVendor BLOT-LINE Anaplasma IgG a IgM, kombinované testy BLOT-LINE Borrelia/HGA IgG a IgM a Microblot-Array Borrelia s antigénmi A. phagocytophilum. Tieto metódy poskytujú podľa konkrétnej diagnostickej otázky cielené alebo kombinované informácie o reaktivite voči jednotlivým antigénom.

Keďže samotné sérologické vyšetrenie neumožňuje stanoviť diagnózu akútnej anaplazmózy, výsledky je vždy potrebné interpretovať s ohľadom na fázu ochorenia a príslušný diagnostický algoritmus.

Prispôsobte diagnostický postup potrebám laboratória

Voľba najvhodnejšieho riešenia nezávisí iba od typu ochorenia. Podobu laboratórneho postupu ovplyvňuje aj počet spracovávaných vzoriek, dostupné prístrojové vybavenie, odborné zázemie laboratória a podiel komplexných prípadov.

CLIA: automatizované prvotné vyšetrenie protilátok

Laboratóriám spracúvajúcim vyšší počet vzoriek umožňuje CLIA vykonávať rutinné vyšetrenia automatizovane, bez potreby priebežnej obsluhy, so štandardizovaným spracovaním a kratším časom manuálnej práce. Mimoriadne prínosná môže byť pre laboratóriá, ktoré prechádzajú z manuálnej alebo poloautomatizovanej metódy ELISA na integrovanejší, automatizovaný pracovný postup.

V rámci portfólia BioVendor podporuje CLIA rutinné vyšetrenie protilátok proti boréliám a TBEV a môže slúžiť ako automatizovaný prvý krok širšieho diagnostického postupu. Reaktívne alebo hraničné výsledky vyšetrenia protilátok proti boréliám možno následne overiť vhodnou konfirmačnou metódou. Vybrané testy CLIA možno pri podozrení na neuroboreliózu využiť aj na výpočet protilátkového indexu z párových vzoriek séra a mozgovomiechového moku.

ELISA: flexibilné využitie existujúceho vybavenia

ELISA zostáva pre mnohé nezávislé aj nemocničné laboratóriá dostupnou metódou. Umožňuje využívať existujúce vybavenie, spracovávať rôzne veľké série vzoriek a možno ju zaviesť bez potreby investovať do plne automatizovanej platformy.

Pre menšie laboratóriá a laboratóriá so strednou kapacitou môže ELISA predstavovať praktický prvý krok k poskytovaniu kompletnej diagnostickej služby. Rutinné vyšetrenie môže zostať flexibilné a zároveň možno zaviesť konfirmáciu priamo v laboratóriu namiesto odosielania každého reaktívneho alebo hraničného vzorku na externé vyšetrenie.

BLOT-LINE: antigénovo špecifická konfirmácia

BLOT-LINE poskytuje antigénovo špecifické informácie na hodnotenie protilátkovej odpovede IgM a IgG proti boréliám. Hlavné uplatnenie nachádza pri nadväzujúcom vyšetrení pozitívnych alebo hraničných výsledkov, ktoré si vyžadujú konfirmáciu s rozlíšením reaktivity voči jednotlivým antigénom.

Vybrané testy BLOT-LINE obsahujú druhovo špecifické antigény borélií, ktoré umožňujú podrobnejšie hodnotenie protilátkovej odpovede. BLOT-LINE Borrelia/HGA IgG zahŕňa aj rekombinantný antigén TpN17, ktorý pomáha odhaliť možnú skríženú reaktivitu protilátok proti Treponema pallidum.

Laboratóriu, ktoré už vykonáva vyšetrenie protilátok proti boréliám, ale vzorky na imunoblotové vyšetrenie odosiela externe, môže zavedenie konfirmácie priamo na pracovisku zabezpečiť plynulú nadväznosť medzi prvotným výsledkom, antigénnym profilom a konečnou interpretáciou.

Microblot-Array: podrobná analýza specializovaných případů 

Microblot-Array Borrelia je určený na konfirmáciu pozitívnych alebo hraničných sérologických výsledkov. Deteguje protilátky proti rekombinantným antigénom jednotlivých druhov rodu Borrelia a baktérie A. phagocytophilum a možno ho použiť na vyšetrenie séra, plazmy, mozgovomiechového moku a synoviálnej tekutiny. Jeho multiplexný formát poskytuje podrobné informácie o reaktivite voči jednotlivým antigénom v rámci pracovného postupu založeného na mikrotitračnej doštičke.

Test obsahuje aj doplnkové markery, ktoré napomáhajú posúdeniu možnej skríženej reaktivity: TpN17 pre Treponema pallidum v teste IgG a VCA-p18 pre EBV v teste IgM. To môže laboratóriám uľahčiť interpretáciu profilov protilátok proti boréliám v prípadoch, keď môže výsledok komplikovať skrížená reaktivita.

Microblot-Array možno zaradiť do rutinného konfirmačného postupu. Ďalší prínos ponúka v prípadoch vyžadujúcich širšie spektrum informácií o reaktivite voči jednotlivým antigénom, pri potrebe minimalizovať spotrebu vzorky alebo pri analýze špeciálnych typov vzoriek, ako sú mozgovomiechový mok a synoviálna tekutina. Zahrnutie antigénov A. phagocytophilum zároveň podporuje hodnotenie vybraných prípadov, pri ktorých sa zvažuje infekcia baktériami rodu Anaplasma.

Kde môže BioVendor posilniť pracovný postup vášho zákazníka?

Laboratóriá sa môžu líšiť počtom spracovávaných vzoriek, mierou automatizácie, typmi vzoriek aj rozsahom vyšetrení vykonávaných priamo na pracovisku. Niektoré už môžu rutinne vyšetrovať protilátky proti boréliám a TBEV, ale vybrané konfirmačné alebo zložitejšie vyšetrenia zadávajú externému laboratóriu. Iné môžu hľadať spôsob, ako automatizovať vyšetrenie väčšieho počtu vzoriek alebo rozšíriť svoj pracovný postup o ďalšie metódy a typy vzoriek.

Komplexný pracovný postup neznamená, že na každú diagnostickú otázku musí odpovedať jediná platforma. Vyžaduje však, aby bol každý krok – od vyhľadávacieho vyšetrenia cez konfirmáciu (ak je indikovaná) až po podrobnejšiu analýzu – jasne definovaný a nadväzoval na ostatné. Kľúčové je, či existujúca kombinácia metód poskytuje potrebnú mieru informácií pre ochorenia, typy vzoriek a klinické indikácie, ktorými sa laboratórium zaoberá.

BioVendor prepája flexibilné a automatizované vyšetrenie protilátok, antigénovo špecifickú konfirmáciu a multiplexné riešenia pre komplexnejšie vyšetrenia. Naši špecialisti vám pomôžu určiť, v ktorých častiach existujúceho pracovného postupu by mohla byť prínosná ďalšia automatizácia, konfirmácia priamo v laboratóriu alebo širšie spektrum možností vyšetrenia.

Prekonzultujte so špecialistom nastavenie testovania ochorení prenášaných kliešťami.